PCR實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃方案
PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。此項(xiàng)技術(shù)可迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,給臨床提供了可靠的依據(jù)。
PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組 PCR 實(shí)驗(yàn),通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程,若實(shí)驗(yàn)工藝需要,還應(yīng)增加樣品粉碎過程。
1、分散形式 PCR 實(shí)驗(yàn)室
分散形式 PCR 實(shí)驗(yàn)室,是指完成上述實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房彼此相距較遠(yuǎn),呈分散布置形式。對于這種布置形式的 PCR 實(shí)驗(yàn)室,由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)之間不易相互干擾,因此無需特殊條件要求。
2、組合形式 PCR 實(shí)驗(yàn)室
組合形式 PCR 實(shí)驗(yàn)室, 是指完成 PCR 四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房相鄰布置,組成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)域的形式。對于組合形式 PCR 實(shí)驗(yàn)室,由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)間集中布置,容易造成相互干擾,因此,對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間,以減少室內(nèi)外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入,造成污染;核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓,以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品。
如果使用熒光 PCR 儀,擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。
若房間進(jìn)深允許,可設(shè) PCR 內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面,緩沖間比專用走廊更有意義。
各個(gè)區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護(hù)屏障,避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾,防止核酸氣溶膠對實(shí)驗(yàn)過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。
PCR實(shí)驗(yàn)室的空氣流向必須嚴(yán)格按照試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)空氣壓力逐漸遞減方式進(jìn)行,防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域。需要嚴(yán)格的通風(fēng)設(shè)計(jì),若通風(fēng)設(shè)計(jì)不合理,會(huì)使風(fēng)速流向混亂,甚至危害人們健康。
標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)規(guī)范
1、主體結(jié)構(gòu)
主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金 50 內(nèi)圓角鋁,從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結(jié)構(gòu)牢固,線條簡明,美觀大方,密封性好。
2、標(biāo)準(zhǔn)的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)
將 PCR 過程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和 PCR 擴(kuò)增檢測三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū), 同時(shí)各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié),使整個(gè) PCR 實(shí)驗(yàn)過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
可打開緩沖區(qū),PCR 擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣,在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口,空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。
3、消毒
在實(shí)驗(yàn)區(qū)和緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈,供消毒用。
在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)還設(shè)置移動(dòng)紫外線燈,對實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。
4、機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗
試劑和標(biāo)本通過機(jī)械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞,保證試劑和標(biāo)本在傳遞過程中不受污染(人物分流)。
5、地面
地面建議使用 PVC 卷材地面或自流坪地面,整體性好。便于進(jìn)行清掃,耐腐蝕。如節(jié)約成本也可采用水磨石地面,或大塊的瓷磚(至少 800mm×800mm)接縫需要小于 2mm。
6、照明
燈具要選用凈化燈具,能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。
在建設(shè)的過程中應(yīng)注意
● 規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。
● 嚴(yán)格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程。
● 安裝前需要確定以下安裝條件,如:電源電壓,電源進(jìn)線位置,電話網(wǎng)絡(luò)線進(jìn)線位置,進(jìn)水水壓,最小安裝空間,地面平整度,通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等,理想狀態(tài)的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。
● 實(shí)驗(yàn)室的墻體,包括頂棚,應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧形線條過渡;墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。